1. Apabila menentukan endotoksin dalam darah, perhatikan pemilihan kaedah dan reagen.

2. Penyediaan plasma atau serum

Sebagai sampel klinikal biasa, plasma adalah sampel utama, dan kadar penggunaannya lebih daripada 95%. Oleh itu, adalah sangat penting untuk menyediakan plasma sebagai bahagian utama cecair badan. Menurut Das, endotoksin secara amnya melekat pada platelet sebagai tambahan kepada keadaan bebasnya, jadi adalah lebih sesuai untuk menggunakan plasma yang mengandungi sejumlah besar platelet sebagai sampel. Apabila menyediakan plasma manusia atau plasma haiwan, pada masa ini, untuk mengelakkan kerosakan sel, negara asing kebanyakannya menggunakan pemisahan suhu rendah, menggunakan sampel plasma yang mengandungi sejumlah besar platelet, iaitu, pada 4 ℃ 1000gx10 minit keadaan pemisahan, atau 3000gx40 keadaan pemisahan saat apabila tiada emparan suhu rendah. Ia tidak dibenarkan menjalankan pengasingan berkelajuan tinggi dan jangka panjang di bawah suhu biasa. Di samping itu, apabila memisahkan plasma atau serum, pencemaran bakteria harus dielakkan.

Penyediaan serum: gunakan picagari tanpa antikoagulan untuk mengumpul darah dan memindahkannya ke dalam tiub emparan, dan letakkannya dalam mandi air ais selama 30 minit, pada 4 ℃, 1000xg, 10 minit untuk sentrifugasi.

Selepas pemisahan plasma atau serum, jika tidak digunakan buat sementara waktu, ia boleh dibekukan pada - 80 ℃ dan digunakan dalam masa 1 bulan. Nota Untuk mengelakkan penjerapan endotoksin, sila gunakan tabung uji kaca untuk penyimpanan.

3. Jenis dan kesan antikoagulan

Semasa penyediaan plasma, disebabkan penambahan antikoagulan tertentu, jenis dan jumlah antikoagulan mempunyai kesan yang besar terhadap kadar pemulihan. Secara amnya, antikoagulan yang biasa digunakan terutamanya termasuk heparin, natrium sitrat, dan EDTA, antaranya heparin adalah yang paling banyak digunakan. Walau bagaimanapun, kita tahu bahawa sejumlah besar heparin akan mengganggu tindak balas endotoksin, terutamanya untuk kaedah pemanasan pencairan dan kaedah pengekstrakan kloroform, yang akan mengurangkan kadar pemulihan, tetapi mempunyai kesan yang kurang pada kaedah PCA, jadi jumlah heparin ditambah. dan dikeluarkan semasa penyediaan plasma hanya memerlukan 2~5 μ L/ml sahaja.