Secara umumnya, disebabkan oleh komposisi darah yang kompleks, banyak bahan, terutamanya plasma atau serum haiwan yang lebih tinggi, mempunyai kesan gangguan yang kuat terhadap tindak balas antara reagen TAL (LAL) dan endotoksin. Oleh itu, apabila kita menguji endotoksin sampel tersebut, kita mesti mengeluarkan bahan yang mengganggu sebelum ujian.
Pada masa ini, bahan-bahan yang mengganggu dalam plasma terutamanya termasuk pelbagai perencat protease, protein pengikat endotoksin, dan perencat plasminogen. Untuk kolorimetri, faktor Xa boleh menguraikan rantai peptida Boc-LEU-Gly-Arg-PNA. Oleh itu, adalah perlu untuk menghapuskan bahan-bahan yang mengganggu ini sebelum penentuan.
Kaedah prarawatan untuk membuang bahan yang mengganggu dalam darah adalah seperti berikut:
(1) Kaedah pemanasan pencairan: plasma dicairkan sebanyak 3~10 kali dengan air terlarut, dan kemudian dipanaskan dalam air 37~100 ℃. Masa pegangan biasanya 5 ~ 10 minit;
(2) Kaedah pengekstrakan kloroform: tambah jumlah kloroform yang sama ke plasma dan bergetar selama 3 jam, kemudian ambil lapisan atas untuk pengesanan;
(3) Kaedah rawatan eter: tambah eter ke plasma untuk rawatan dan keluarkan eter pada 40 ℃;
(4) Kaedah asid trifluoroacetic: tambah asid asetik ke dalam plasma untuk melaraskan pH 4.0, dan kemudian gunakan K2HPO4 untuk melaraskan pH kepada 7~7.5;
(5) Kaedah rawatan surfaktan: seperti kaedah pemanasan pencairan, hanya air pencairan ditukar kepada surfaktan;
(6) Penapisan gel;
(7) Kaedah rawatan alkali: plasma disimpan pada 0.2NNaOH 37 ℃ selama 10 minit dan kemudian dineutralkan dengan HCl;
(8) Kaedah asid perklorik (PCA) atau kaedah asid perklorik baharu (PCA Baharu);
(9) Kaedah manik: masukkan resin khas penyerap endotoksin ke dalam plasma, keluarkan, dan tambah reagen LAL untuk tindak balas.
Antara kaedah ini, kaedah yang biasa digunakan ialah kaedah pengekstrakan kloroform, kaedah pemanasan pencairan, kaedah asid perklorik (PCA), dan kaedah asid perklorik baharu (PCA Baru). Dua kaedah pertama perlu dibincangkan semasa penentuan kerana kewujudan kadar pemulihan endotoksin, positif palsu, dan masalah lain. Kaedah PCA (kaedah PCA baharu), disebabkan kadar pemulihan endotoksin tambahan yang baik, pada masa ini digunakan terutamanya dalam rawatan praklinikal di Jepun.